在野外森林中采摘品质优良的野生冬荪菌蛋，对菌蛋进行子实体、皮分离，再将子实体注入试管培养基中进行培育，此时温度要保持在15℃—23℃，待试管中母种长满试管后，将试管中培养的母种进行一级分离到玻璃瓶中进行培育，当菌丝又一次长满玻璃瓶时进行二级分离，将二级分离的种子分离到塑料袋中进行培育，当菌丝再次布满塑料袋而无杂菌时就制了成栽培种，栽培种就可以直接栽种了。